
核酸提取通常是决定质量高低的关键因素之一,在核酸提取过程中,一方面要保证满足下游应用的纯度、浓度、得率的要求,另一方面也要尽量避免造成核酸断裂和降解的各种因素,以保证核酸的完整性,为后续的实验打下基础,依诺赞带你来了解核酸提取的分类、提取原则、提取步骤、常规核酸提取方法对比及涉及的样本类型等基础知识。
DNA提取广泛应用于各种生物学研究及临床诊断领域,为得到纯净的DNA,需在提取过程中加入RNase以降解样本中的RNA,从而得到比较纯净的DNA。核酸提取中,根据样本种类的不同,通常需要采用不同的方式对样本进行处理,才能得到纯度更高的核酸。在使用过程中,都需要根据样本的特性选择合适的样本前处理方式,并以反应体系进行核酸提取工作。

在采样和保存途中通常需特殊的保存液,抑制核酸酶对样本的降解作用,才能保证实验有较高的成功率。普通植物样本如小麦、玉米、水稻等存在细胞壁结构、内部还有液泡、叶绿体等细胞器结构,成分相对复杂,提取前应使用液氮研磨,研磨充分同时保证样本处于低温条件下避免DNA降解。
一般用于基因结构和功能研究以及基因诊断等领域,通常要求得到的片段长度不小于100~200kb。多糖多酚植物样本如水果果肉、植物种子等因内含的多糖与核酸理化性质一致、多酚氧化后易于核酸结合,影响DNA的提取,通常在提取过程中需要用专门试剂对多糖多酚去除后才能得到较高纯度DNA。