
在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法,用体外重组方法将它们插入克隆载体,形成重组克隆载体,依诺赞生物通过转化与转导的方式,引入适合的寄主体内得到复制与扩增,然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体,可以得到插入DNA的许多拷贝,从而获得基因扩增的目的。
DNA分子与载体分子连接是克隆过程中的重要环节之一,粘性末端连接是将DNA片段两端的互补碱基顺序称之为粘性末端,用同一种限制性内切酶消化DNA可产生相同的粘性末端。在连接酶的作用下可恢复原样,有些限制性内切酶虽然识别不同顺序,却能产生相同末端。

平头末端连接是用物理方法制备的DNA往往是平头末端,有些酶也可产生平头末端。平头DNA片段可在某些DNA连接酶作用下连接起来,但连接效率不如粘性末端高;人工接头分子连接是在平头DNA片段末端加上一段人工合成的,具有某一限制性内切酶识别位点的寡核苷酸片段,经限制性内切酶作用后就会产生粘性末端。
通过遗传工程看到癌细胞具有逆转为正常细胞的可能性,例如病毒引起的小鼠肿瘤细胞,在温度高时可逆转为正常细胞。在工业生产方面以分子克隆技术为主体的基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程,四者紧密联系、常综合利用。